氘代磺胺間二甲氧嘧啶（d-SDM）檢測技術及檢測項目

一、檢測背景與意義

1. • d-SDM是SDM的同位素標記物，化學性質與母體化合物相似，但因氘（²H）取代氫（¹H）后具有更高分子量，便于質譜區分。
   • 主要用途：作為內標物用于高效液相色譜-串聯質譜（HPLC-MS/MS）分析，校正樣品前處理及儀器分析過程中的誤差。
2. • 藥物開發：追蹤原型藥物及其代謝產物的動力學行為。
   • 食品安全：檢測動物源性食品（如肉類、乳制品）中SDM殘留，確保符合限量標準。
   • 環境監測：評估SDM在環境中的遷移轉化及生態風險。

二、主要檢測項目

1. 藥物質量控制檢測

• 純度分析 檢測d-SDM的化學純度及同位素豐度（如氘代率≥98%），確保其符合內標物標準。 方法：核磁共振（NMR）、高分辨質譜（HRMS）。
• 穩定性驗證 評估d-SDM在不同儲存條件（溫度、濕度）下的穩定性，確認其適用性。

2. 殘留檢測

• 動物源性食品中的SDM殘留 通過檢測d-SDM作為內標，定量分析SDM在肉類、魚類、乳制品中的殘留量。 限量標準：
  • 中國GB 31650-2019：SDM在動物肌肉中殘留限量為100 μg/kg。
  • 歐盟EC No 37/2010：SDM殘留限量為50 μg/kg。
• 代謝產物分析 結合d-SDM追蹤SDM的乙酰化代謝產物（如N4-乙酰磺胺間二甲氧嘧啶）。

3. 環境樣本檢測

• 水體與土壤中的SDM殘留 檢測污水處理廠出水、農業徑流中的SDM及其轉化產物。 方法：固相萃取（SPE）結合LC-MS/MS，定量限（LOQ）可達0.1 ng/L。
• 生態毒理學研究 評估SDM對水生生物（如魚類、藻類）的慢性毒性效應。

4. 方法學驗證

• 回收率與精密度 通過加標實驗驗證d-SDM作為內標的回收率（通常要求70%~120%）及相對標準偏差（RSD<15%）。
• 基質效應評估 分析不同樣本基質（如豬肝、牛奶）對檢測信號的影響。

三、檢測技術與方法

1. 色譜-質譜聯用技術

• HPLC-MS/MS： 選擇反應監測（SRM）模式下，d-SDM的特征離子對（如m/z 319→156）用于定量，消除基質干擾。
• LC-QTOF： 高分辨質譜用于確認d-SDM的同位素分布，區分其與原型藥物。

2. 免疫分析法

• 酶聯免疫吸附試驗（ELISA）： 快速篩查大量樣本，但需注意交叉反應（如與其他磺胺類藥物的交叉性）。

3. 同位素稀釋法

• 在樣品前處理前加入d-SDM作為內標，校正提取效率及儀器響應的波動。

四、樣品前處理流程

1. 動物組織/食品樣本
   • 均質化→乙腈提取→C18固相萃取柱凈化→氮吹濃縮→復溶后上機分析。
2. 環境水樣
   • 調節pH至6.5→HLB固相萃取柱富集→甲醇洗脫→濃縮定容。

五、法規與標準

• 中國：《GB/T 21316-2007 動物源性食品中磺胺類藥物殘留的測定》。
• 國際：CLSI EP17-A2（臨床質譜方法驗證指南）。

六、總結