食品衛生微生物學檢驗中志賀氏菌檢測的重要性

志賀氏菌（Shigella）是引發細菌性痢疾的主要病原體之一，其傳播途徑包括污染的水源、食物及人與人接觸。由于志賀氏菌感染癥狀嚴重（如腹瀉、發熱、腹痛等），且具有高度傳染性，食品中志賀氏菌的檢測在食品安全和公共衛生領域至關重要。在食品加工、流通及消費環節中，一旦食品被志賀氏菌污染，可能引發群體性食源性疾病，甚至造成區域性公共衛生事件。因此，建立科學、高效的志賀氏菌檢驗方法，是保障食品衛生安全的重要環節。

檢測項目

志賀氏菌的檢驗主要包括以下核心項目：

• 樣品采集與預處理：根據食品類型（如肉類、乳制品、即食食品）選擇代表性樣本，并進行均質化處理。
• 增菌培養：通過選擇性培養基（如GN增菌液）富集志賀氏菌，抑制非目標菌生長。
• 選擇性分離：利用SS瓊脂、麥康凱瓊脂等培養基分離可疑菌落。
• 生化鑒定：通過氧化酶試驗、糖發酵試驗等驗證菌株特性。
• 血清學試驗：針對志賀氏菌的4種血清群（A/B/C/D）進行分型確認。
• 分子生物學檢測：采用PCR技術檢測志賀氏菌特異性基因（如ipaH、ial）。

檢測儀器

檢測過程中需使用以下關鍵儀器設備：

• 生物安全柜：確保操作人員與樣品間的生物隔離。
• 恒溫培養箱：用于增菌培養及平板菌落孵育（通常設定35-37℃）。
• 全自動微生物鑒定系統：如VITEK 2 Compact，快速完成生化鑒定。
• PCR儀：用于核酸擴增，檢測志賀氏菌特異性基因。
• 顯微鏡及顯微成像系統：觀察菌體形態及染色特性。

檢測方法

志賀氏菌檢驗的標準化流程包括：

1. 樣品處理：25g食品樣本與225mL增菌液混合，均質后37℃培養18-24小時。
2. 選擇性分離：取增菌液接種至SS瓊脂和麥康凱瓊脂，37℃培養24小時后觀察菌落特征。
3. 生化試驗：挑取可疑菌落進行TSI試驗（三糖鐵瓊脂）、尿素酶試驗、賴氨酸脫羧酶試驗等。
4. 血清凝集試驗：使用多價和單價志賀氏菌診斷血清進行玻片凝集反應。
5. 分子檢測：提取細菌DNA后，通過實時熒光PCR檢測ipaH基因，提升檢測靈敏度與特異性。

檢測標準

我國現行標準主要依據：

• GB 4789.5-2012《食品安全國家標準 食品微生物學檢驗 志賀氏菌檢驗》：規定了傳統培養法與分子檢測的詳細步驟。
• ISO 21567:2004：國際標準化組織關于食品中志賀氏菌檢測的參考方法。
• SN/T 1870-2016：出口食品中志賀氏菌的實時熒光PCR檢測方法。

檢測過程需嚴格遵循標準操作程序，確保結果準確性，同時定期進行實驗室質量控制（如陽性對照、陰性對照及空白試驗）。