動物己烯雌酚殘留酶聯免疫吸附試驗檢測

己烯雌酚（Diethylstilbestrol, DES）是一種人工合成的非甾體雌激素，曾廣泛用于畜牧業中促進動物生長和治療疾病。然而，由于其潛在的致癌性、生殖毒性及內分泌干擾作用，許多國家已嚴格限制或禁止其在食用動物中的使用。動物源性食品中己烯雌酚的殘留可能通過食物鏈進入人體，對健康造成長期危害。因此，建立高效、靈敏的檢測方法對保障食品安全至關重要。酶聯免疫吸附試驗（ELISA）因其特異性強、操作簡便、成本低等特點，成為檢測己烯雌酚殘留的主流技術之一。

檢測項目

本檢測項目主要針對動物組織（如肌肉、肝臟、腎臟）、尿液、血液及乳制品中的己烯雌酚殘留量。檢測范圍需覆蓋痕量殘留（通常為μg/kg或ppb級），以滿足國際國內食品安全限量標準的要求。

檢測儀器

ELISA檢測需配備以下核心儀器：
1. 酶標儀：用于測定反應體系的吸光度值（OD值），推薦使用波長450nm的微孔板讀數器。
2. 微量移液器：用于精確加樣，確保試劑體積準確性。
3. 離心機：用于樣品前處理中的沉淀分離。
4. 恒溫培養箱：控制抗原抗體反應溫度（通常為37℃）。
5. 洗板機：用于反應后微孔板的洗滌步驟。

檢測方法

ELISA檢測基于競爭性免疫反應原理，具體步驟如下：
1. 樣品前處理：取待測樣本經均質化、溶劑提取（如甲醇-水體系）、離心后取上清液純化。
2. 包被：將己烯雌酚特異性抗體固定在微孔板表面。
3. 競爭反應：加入待測樣品和酶標記的己烯雌酚類似物，兩者競爭結合抗體。
4. 顯色：加入底物（如TMB），酶催化反應生成有色產物，顏色深淺與殘留量成反比。
5. 定量分析：通過標準曲線計算樣品中己烯雌酚濃度，檢測靈敏度可達0.1μg/kg。

檢測標準

檢測需遵循以下國內外標準：
1. 中國國家標準：GB/T 20750-2008《動物源性食品中己烯雌酚殘留量的測定 酶聯免疫吸附法》。
2. 歐盟法規：EU Regulation 37/2010規定動物源性食品中DES的殘留限量為“不得檢出”（LOD≤1μg/kg）。
3. 國際方法驗證：參照AOAC Official Method 2011.19進行方法學驗證，確保準確性（回收率80%-120%）和精密度（RSD＜15%）。

總結而言，ELISA技術為動物己烯雌酚殘留檢測提供了快速篩查手段，適用于大規模樣本的初篩。對于陽性樣本，可進一步采用液相色譜-質譜聯用（LC-MS/MS）進行確證分析，以確保檢測結果的可靠性。