馬病毒性動(dòng)脈炎(馬病毒性動(dòng)脈炎病毒感染)檢測(cè)
實(shí)驗(yàn)室擁有眾多大型儀器及各類分析檢測(cè)設(shè)備,研究所長(zhǎng)期與各大企業(yè)、高校和科研院所保持合作伙伴關(guān)系,始終以科學(xué)研究為首任,以客戶為中心,不斷提高自身綜合檢測(cè)能力和水平,致力于成為全國(guó)科學(xué)材料研發(fā)領(lǐng)域服務(wù)平臺(tái)。
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馬病毒性動(dòng)脈炎(馬病毒性動(dòng)脈炎病毒感染)概述
馬病毒性動(dòng)脈炎(Equine Viral Arteritis, EVA)是由馬動(dòng)脈炎病毒(EAV)引起的一種傳染性疾病,主要影響馬屬動(dòng)物(如馬、驢、騾等)。該病以呼吸道癥狀、發(fā)熱、流產(chǎn)(妊娠母馬)及全身性血管炎為主要特征,具有高度傳染性,對(duì)馬匹健康及養(yǎng)殖業(yè)經(jīng)濟(jì)危害極大。EAV通過直接接觸、精液傳播或呼吸道分泌物傳播,感染后可能導(dǎo)致隱性感染或急性發(fā)病,嚴(yán)重時(shí)可引發(fā)大規(guī)模疫情。因此,及時(shí)準(zhǔn)確的檢測(cè)對(duì)防控疫情、保障馬匹健康及國(guó)際動(dòng)物貿(mào)易安全至關(guān)重要。
檢測(cè)項(xiàng)目
EVA的檢測(cè)項(xiàng)目主要包括以下幾個(gè)方面:
1. 病毒分離與鑒定:通過采集病料(如鼻拭子、血液、精液或流產(chǎn)胎兒組織)進(jìn)行病毒培養(yǎng),分離并鑒定EAV。
2. 血清學(xué)抗體檢測(cè):檢測(cè)馬匹血清中的EAV特異性抗體(IgG和IgM),用于判斷既往感染或疫苗接種效果。
3. 核酸檢測(cè)(RT-PCR):通過分子生物學(xué)技術(shù)檢測(cè)病毒RNA,適用于早期診斷和攜帶者篩查。
4. 抗原檢測(cè):利用免疫熒光(IFA)或ELISA技術(shù)直接檢測(cè)樣本中的病毒抗原。
檢測(cè)儀器
EVA檢測(cè)中常用的儀器包括:
1. PCR儀:用于病毒RNA的擴(kuò)增和檢測(cè)。
2. 酶標(biāo)儀(ELISA Reader):用于讀取ELISA試驗(yàn)中的光密度值,判斷抗體或抗原的存在。
3. 細(xì)胞培養(yǎng)設(shè)備:如CO?培養(yǎng)箱、生物安全柜,用于病毒分離與擴(kuò)增。
4. 熒光顯微鏡:用于觀察免疫熒光標(biāo)記的抗原抗體反應(yīng)。
檢測(cè)方法
1. 病毒分離法:將樣本接種于敏感細(xì)胞系(如RK-13細(xì)胞),觀察細(xì)胞病變效應(yīng)(CPE),結(jié)合免疫學(xué)方法確認(rèn)病毒。
2. RT-PCR技術(shù):提取樣本RNA后,通過逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴(kuò)增病毒特異性基因片段(如ORF7),結(jié)合電泳或?qū)崟r(shí)熒光定量分析結(jié)果。
3. ELISA檢測(cè):采用包被EAV抗原的微孔板捕獲血清中的抗體,通過酶標(biāo)二抗顯色定量分析。
4. 免疫熒光試驗(yàn)(IFA):將樣本固定于載玻片,加入熒光標(biāo)記抗體,通過熒光顯微鏡觀察特異性熒光信號(hào)。
檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)
EVA檢測(cè)需遵循國(guó)際及國(guó)內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)以確保結(jié)果可靠性:
1. 世界動(dòng)物衛(wèi)生組織(OIE)標(biāo)準(zhǔn):推薦病毒分離、血清中和試驗(yàn)(SNT)及RT-PCR為官方診斷方法。
2. 國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)(GB/T):中國(guó)《馬病毒性動(dòng)脈炎診斷技術(shù)》(GB/T 22915-2008)規(guī)定了病毒分離、ELISA和RT-PCR的操作規(guī)范。
3. 行業(yè)規(guī)范:如實(shí)驗(yàn)室生物安全等級(jí)(BSL-2)、質(zhì)控樣本使用及結(jié)果判讀閾值要求。
通過以上檢測(cè)項(xiàng)目、儀器、方法及標(biāo)準(zhǔn)的綜合應(yīng)用,可實(shí)現(xiàn)對(duì)EAV感染的高效診斷與監(jiān)測(cè),為馬群的健康管理和疫情控制提供科學(xué)依據(jù)。

