天冬氨酸氨基轉移酶（AST）檢測試劑盒（酶法）完整解析
一、檢測原理（酶法）
二、樣本要求
- 樣本類型：血清或肝素抗凝血漿（避免使用溶血、脂血樣本）。
- 采集與處理：
- 空腹采血（避免飲食干擾）。
- 樣本靜置30分鐘后離心（3000rpm，10分鐘），及時分離血清。
- 2-8℃保存可穩定7天，長期保存需-20℃以下。
三、檢測步驟（以全自動生化分析儀為例）
- 試劑配制：按說明書復溶凍干試劑，平衡至室溫。
- 參數設置：
- 波長：340nm（主）/ 405nm（副）。
- 溫度：37℃。
- 方法：速率法（監測60-180秒內吸光度變化）。
- 操作流程：
- 樣本與試劑按比例混合（如3μL樣本+300μL試劑）。
- 測定ΔA/min，通過公式計算AST活性： AST活性（U/L）= ΔA/min × 因子（F） （F由試劑盒提供，與反應體積、光程等相關）
四、參考范圍
- 成人正常值：5-40 U/L（不同儀器/試劑可能有差異）。
- 臨床解讀：
- 輕度升高（<3倍）：脂肪肝、慢性肝炎、藥物性肝損。
- 顯著升高（>10倍）：急性病毒性肝炎、急性心肌梗死、橫紋肌溶解。
- AST/ALT比值：
-
- <1：急性病毒性肝炎（ALT升高更顯著）。
-
五、臨床意義
- 肝臟疾病：
- 急性肝炎：AST與ALT同步升高，ALT常高于AST。
- 肝硬化/肝癌：AST持續升高，AST/ALT比值增大。
- 心臟疾病：
- 急性心梗：AST在發病6-8小時后升高，24-48小時達峰。
- 肌肉損傷：
- 劇烈運動、創傷、肌炎等均可導致AST升高。
六、注意事項
- 干擾因素：
- 溶血（紅細胞內AST含量高）、脂血（影響光吸收）、某些藥物（如他汀類、抗生素）。
- 質量控制：
- 每日使用高、低值質控品校準，參與室間質評。
- 局限性：
- AST缺乏組織特異性，需結合ALT、ALP、GGT等指標綜合判斷。
七、試劑盒組成（示例）
- R1：α-酮戊二酸、NADH、MDH/LDH（緩沖液：Tris-HCl，pH 7.8）。
- R2：L-天冬氨酸（激活反應）。
- 校準品：AST活性標準液（需溯源至國際標準）。
八、總結
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