- 氨基脲（Semicarbazide, SEM）：呋喃西林的主要代謝標志物，可通過結合蛋白質穩定存在于肌肉、肝臟等組織中。
- 其他關聯代謝物：如呋喃西林酮（AOZ）等，需根據檢測標準進行聯合分析。
- 檢測對象：
- 氨基脲（SEM）及其蛋白結合態形式。
- 其他硝基呋喃類代謝物（如AMOZ、AHD、AOZ）的聯合檢測，以排除交叉污染干擾。
- 檢測限值：
- 歐盟規定：動物源性食品中SEM的殘留限值為1.0 μg/kg（以組織樣本計）。
- 中國國家標準（GB 31650-2019）要求不得檢出。
- 適用樣品：
- 動物組織（肌肉、肝臟、腎臟、水產等）、蛋類、蜂蜜、乳制品。
- 前處理步驟：
- 水解：在酸性條件下（pH 1.0-2.0）水解結合態代謝物為游離態。
- 衍生化：使用鄰硝基苯甲醛（NBA）等衍生化試劑，提高檢測靈敏度。
- 凈化：固相萃取（SPE）、免疫親和柱等技術去除雜質。
- 液相色譜-串聯質譜法（LC-MS/MS）
- 優勢：高靈敏度（檢測限低至0.1 μg/kg）、特異性強，可同時檢測多種硝基呋喃代謝物。
- 應用標準：國際公認的“金標準”，符合歐盟2003/181/EC、中國GB/T 21311-2007等標準。
- 酶聯免疫吸附法（ELISA）
- 優勢：快速篩查、成本低，適用于大批量樣本初篩。
- 局限性：可能出現假陽性，需結合儀器法驗證。
- 高效液相色譜法（HPLC）
- 適用場景：配備紫外或熒光檢測器的HPLC用于基礎檢測，靈敏度較LC-MS/MS低。
- 空白對照：避免試劑或環境中的SEM污染（如某些塑料制品含SEM）。
- 加標回收率：要求回收率在70%-120%之間，確保方法準確性。
- 基質效應評估：針對不同樣品類型優化前處理流程。
- 食品安全保障：避免消費者長期攝入致癌風險物質。
- 國際貿易合規：出口食品需符合歐盟、日本等嚴苛標準，規避貿易壁壘。
- 技術挑戰：
- 代謝物與組織蛋白結合緊密，需優化提取效率。
- 環境本底干擾（如面粉漂白劑可能導致SEM假陽性）。
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