一、核心檢測項目

1. • 內標準基因：CruA（油菜特異性基因）、HMG（高度保守基因）等，用于驗證DNA提取質量及PCR有效性。
   • 目標基因：如抗除草劑基因 CP4-EPSPS、抗蟲基因 Cry1Ab 等，檢測轉基因品系是否存在。
   • 應用：進出口檢疫、食品安全監管（如歐盟法規EC 1829/2003）。
2. • SSR/SNP分子標記：篩選油菜品種特異性標記（如BnGMS、BnRFLP系列），用于區分雜交種與常規種。
   • DNA指紋圖譜：構建品種標識，防止種子市場假冒。
3. • 抗病基因：如菌核病抗性基因 BnWRKY70、根腫病抗性基因 CRa。
   • 抗逆基因：耐旱基因 BnDREB、耐鹽基因 BnSOS1，輔助育種篩選優良性狀。
4. • 脂肪酸代謝基因：FAD2（調控油酸含量）、FAE1（控制芥酸合成），用于高油酸或低芥酸品種選育。
   • 油脂含量標記：通過關聯分析定位高產油脂的QTL位點。
5. • 雜交種純度檢測：利用親本特異性標記（如InDel標記）驗證雜交種純度（≥95%為合格）。
   • 快速鑒定技術：基于LAMP（環介導等溫擴增）的田間快速檢測。

二、檢測技術方法

1. • 基于SYBR Green或探針法（如TaqMan）定量目標基因，利用內標基因（如CruA）校正數據。
   • 靈敏度：可檢測0.1%的轉基因成分（歐盟閾值要求）。
2. • 無需標準曲線，直接絕對定量，適用于低豐度目標基因檢測（如微量轉基因污染）。
3. • 全基因組重測序或靶向測序，用于未知轉基因事件篩查及復雜性狀基因挖掘。
4. • 定制化芯片檢測多性狀基因（如抗病、品質、產量），適用于大規模育種篩選。

三、應用場景

• 育種研究：加速優良性狀聚合，縮短育種周期。
• 種子質控：確保商業化種子純度與轉基因合規性。
• 食品安全：監控食用油原料中未授權的轉基因成分。
• 國際貿易：滿足各國對油菜產品的差異化準入要求（如中國對進口轉基因油菜的審批制度）。

四、標準化與挑戰

• 國際標準：遵循ISO 21569、GB/T 19495等檢測流程。
• 難點：部分內標基因存在多拷貝或近緣種交叉反應（如與蕪菁基因組的同源性），需優化引物設計。
• 趨勢：CRISPR編輯品種的檢測技術開發，以及AI輔助的基因型-表型關聯分析。