諾如病毒檢測的關鍵項目及技術詳解

一、檢測目標與樣本類型

優(yōu)先檢測對象

• 嘔吐、水樣腹瀉患者（癥狀持續(xù)12-72小時）
• 聚集性胃腸炎事件中的病例排查
• 食品從業(yè)人員及醫(yī)療機構高危人群篩查

樣本采集規(guī)范

1. 糞便樣本：發(fā)病后48-72小時內收集，冷藏保存（4℃≤72小時）；長期需冷凍（-70℃）
2. 嘔吐物：需混懸于生理鹽水后處理
3. 環(huán)境拭子：門把手、餐具等污染區(qū)域采樣

二、核心檢測技術分類及比較

（一）抗原檢測——快速篩查首選

• 原理：雙抗體夾心法檢測衣殼蛋白VP1
• 靈敏度：60-70%（暴發(fā)期） vs 30-40%（散發(fā)病例）
• 優(yōu)勢：批量檢測，操作標準化
• 局限：需專業(yè)設備，窗口期可能漏檢

• 檢測時效：10-15分鐘/樣本
• 臨床價值：適用于急診初篩、基層醫(yī)療機構
• 性能參數(shù)：特異性＞95%，靈敏度約50-60%

（二）核酸檢測——確診金標準

• 靶基因: RdRp區(qū)（高度保守）和VP1區(qū)（分型依據(jù)）
• 技術演進:
  • 常規(guī)RT-PCR：需后續(xù)電泳分析
  • 實時熒光定量PCR：可同時定量病毒載量
  • 多重PCR：同步檢測輪狀病毒、星狀病毒等
• 檢測限：可達10² copies/g糞便

• 優(yōu)勢：無需熱循環(huán)儀，適合現(xiàn)場檢測
• 指標: 60分鐘內完成擴增，靈敏度與PCR相當

（三）電子顯微鏡檢測

• 分辨率：可識別直徑27-40nm的二十面體病毒顆粒
• 應用場景：疫情溯源中的病毒形態(tài)學確認
• 局限：病毒量需＞10? particles/g，設備成本高昂

（四）抗體檢測

• IgG/IgM檢測：主要應用于血清流行病學研究
• 臨床診斷價值有限：抗體產生滯后于急性期癥狀

三、檢測策略選擇指南

四、質量控制的要點

1. 抑制物處理：糞便樣本需用PBS稀釋或柱提取法去除PCR抑制物
2. 內標設置：核酸檢測需加入過程控制內參（如MS2噬菌體）
3. 室間質評：定期參與WHO諾如病毒檢測能力驗證項目

五、新興檢測技術展望

1. CRISPR-Cas檢測系統(tǒng)：特異性識別病毒RNA，靈敏度達單分子級別
2. 微流控芯片：整合核酸提取、擴增與檢測，實現(xiàn)床旁快速診斷
3. 生物傳感器：基于表面等離子體共振（SPR）技術的無標記檢測

六、檢測報告的臨床解讀

• 陽性結果：需結合流行病學史（如接觸史、聚集性發(fā)病）
• 陰性結果：不能完全排除感染（尤其是癥狀初期或采樣不當）
• 病毒載量分析：＞10? copies/g提示急性感染期